期刊:分子植物育种 ISSN:1672-416X , 年:2013 . 卷:11 . 期:2   页码:255-261

摘要

为确立大豆叶、花组织提取总RNA的最佳方法,比较了植物总RNA提取试盒剂法、改良的 CTAB-LiCL法和改良的热硼酸法的提取效果。通过RNA产量、纯度、凝胶电泳及后续的基因克隆和荧光定量PCR等分析,结果表明:热硼酸法所提取的叶、花总RNA含量约为其他两种方法的6倍;总RNA OD_(260)/OD_(280)值介于1.98~2.1;电泳条带完整清晰;应用获得的总RNA所克隆ZAT9-like基因,经测序获得885 bp的核酸序列与ZAT9-like(登录号:XM_003517371.1)基因同源率达99%;荧光定量分析Histone H3基因的扩增曲线与融解曲线峰型良好。说明该方法能够满足一般分子生物学下游实验的要求,是一种理想的针对大豆叶、花总RNA的的提取方法。

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关键词
大豆;  总RNA;  热硼酸法

作者信息

作者机构:
     [1] [ 郭彬;  侯思宇;  黄可盛;  路阳;  韩渊怀 ︾ ]  山西农业大学生物工程研究所
     [2] [ 王玉国 ]  山西农业大学农学院